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    Arcticzymes-PCR研究方案

    發(fā)布時(shí)間: 2023-03-07  點(diǎn)擊次數(shù): 707次

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    多年來(lái),人們一直利用 PCR 產(chǎn)物清除 SAP 和外切核酸酶 I 來(lái)提供一種簡(jiǎn)單有效的方法,在測(cè)序或基因分型之前從 PCR 產(chǎn)物中去除核苷酸和引物。原則上,SAP 使核苷酸去磷酸化,exoI 降解引物,否則引物會(huì)干擾引物延伸反應(yīng)。

    2單位 SAP10單位核酸外切酶在37 °C 孵育15分鐘在80 °C 滅活15分鐘 PCR 產(chǎn)物現(xiàn)在可以進(jìn)行測(cè)序或基因分型了。產(chǎn)品可貯存在攝氏零下20度,直至需要為止。

    蝦堿性磷酸酶/蝦堿性磷酸酶仍然是市面上的黃金標(biāo)準(zhǔn)和第一款不耐熱的堿性磷酸酶。這是一種多用途堿性磷酸酶,可以通過短期熱處理全滅活。在65攝氏度下100% 的熱滅活在限制酶緩沖區(qū)中工作用于聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)清理去除 DNARNA 中的5’-磷酸鹽,熱失活02468100% 20% 40% 60% 80% 100% 65 ° C 75 ° C 分鐘活動(dòng)時(shí)間65 ° C 75 ° C 0100% 100% 0.585% 0% 128% 0% 27% 0.50% 0% 100% 0% 圖表由 VisualizerSAP 制作室溫穩(wěn)定性0728810% 20% 40% 60% 80% 100% 天和室溫剩余活性室溫剩余活性0100794281008196圖表由 VisualizerSAP 制作自1993年上市以來(lái),現(xiàn)已被新的更好的重組形式所取代。重組酶是在 Pichia Pastoris 生產(chǎn)的,具有經(jīng)過充分驗(yàn)證的本地版本的所有特性,但具有額外的好處。該重組版本在環(huán)境溫度下更穩(wěn)定,也具有高純度、一致性,并且可在高濃度的較大批次中使用

    性能規(guī)范單元定義一個(gè)單元將在0.1 M 甘氨緩沖液中,每分鐘1μmol 的對(duì)硝基苯基磷酸鹽在37 °C  pH10.4,1mM  ZnCl 2 MgCl 2以及6mM 4-硝基苯基磷酸鹽中轉(zhuǎn)化為硝基酚和磷酸鹽。這個(gè)單位的定義使1個(gè)單位的 SAP 相當(dāng)于540個(gè)單位的南極磷酸酶(新英格蘭生物實(shí)驗(yàn)室1.3個(gè)單位的 APEX 磷酸酶或35個(gè)單位的 NTPhos 磷酸酶(震中生物技術(shù)公司)。因此,SAP 是具持續(xù)性的替代方案。比活度: > 2000單位/毫克。純度未檢測(cè)到 DNA 酶活性。濃度10000單位/毫升,最高可達(dá)30000單位/毫升。批量: 2,500萬(wàn) -3,500萬(wàn)件/批。在儲(chǔ)存緩沖液(25mM Tris-HCl pH 7.6,5mM MgCl 2,甘油50%)中在 -20 °C 下穩(wěn)定。在室溫下,90天后仍有 > 95% 的活性。然而,這種酶在65 °C 5分鐘后就全失活了。在攝氏75度,SAP 1分鐘后全失效。在一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的熱循環(huán)系統(tǒng)中,從37度到95度再回到37度的加熱過程足以使 SAP 全失去活性。知識(shí)產(chǎn)權(quán)重組 SAP 包括以下專: US 7,323,325EP 1,326,890JP 4,191,479AU 9,398,701以及其他國(guó)家已經(jīng)批準(zhǔn)或正在申請(qǐng)的相關(guān)利。

    克隆載體去磷酸化產(chǎn)生體內(nèi)克隆載體用于同源重組平行克隆大型基因簇。Yeom 律政司司長(zhǎng)李、李、蔡仕及李。基因分型或測(cè)序前核苷酸的降解微衛(wèi)星不穩(wěn)定大腸癌編碼區(qū)點(diǎn)突變的綜合評(píng)估。孔德林 J,薩洛卡斯 K,薩里寧 L,奧瓦斯卡 K,勞安海默 H,普拉凱蒂 RM,漢堡 J,劉 X,亞達(dá)夫 L,吉爾夫 AE,卡朱索 T,漢寧 UA,佩林 K,里斯托萊寧 H,卡泰寧 R,卡西寧 E,坦斯卡寧 T,阿維科 M,泰帕雷 M,泰帕雷 J,雷科寧-西尼薩洛 L,lepist? AKoskensalo SB?hm JMecklin J-POngen HDermitzakis ETKilpivaara OVahtento PTurunen MHautaniemi STuupanen SKarhu AV?lim?ki NVarjosalo MPitk?nen EAaltonen LA.EMBO Mol Med.2018; 10(9) : e8552. 舞毒蛾亞科分子系統(tǒng)學(xué)研究(鱗翅目舞毒蛾科)Dhungel B Wahlberg N.PeerJ.201866日,e4311角色塑造檢測(cè)到一種橫紋肌病毒,可導(dǎo)致黑頭鯰死亡。貝當(dāng)多 G,潘扎林 V,福爾汀 A,贊佩林 G,普雷托 T,布拉汀 A,石英 RSabbion MSalogni CPascoli FToffan A.J Fish Dis2018; 41(7) : 1063-1075.

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    蛋白質(zhì)去磷酸化自磷酸化通過為 α 激酶結(jié)構(gòu)域中的變構(gòu)結(jié)合位點(diǎn)提供配體來(lái)激活盤基網(wǎng)柄菌肌球蛋白 II 重鏈激酶 A2607-16.一種日間調(diào)節(jié)的脫水海欖雌,在體外顯示核質(zhì)定位,并被酪蛋白激酶 II 磷酸化。Mehta PARebala KCVenkataraman GParida A. 植物生理生化。2009; 47(8) : 701-9.SAP 為輔酶及其硫酯的定量提供了一種快速、靈敏的放射化學(xué)檢測(cè)方法。Wadler CCronan JE. Anal Biochem.2007; 368(1) : 17-23.酶消化法測(cè)定寡核苷酸的液相色譜-同位素稀釋質(zhì)譜法的比較。唐納德 CE,斯托克斯 P,奧康納 G,伍爾福德 AJ.J 色譜分析技術(shù)生物生命科學(xué)。2005; 817(2) : 173-82.Nordstr?m T Nourizad K Ronaghi M Nyrén P2000; 282(2) : 186-93.描述性論文/基于 TdT 介導(dǎo)的氯化血紅素/G-四重脫氧核酶納米線的堿性磷酸酶活性靈敏電化學(xué)測(cè)定用于信號(hào)放大。(ScienceDirect 付費(fèi)服務(wù))。劉艷,熊娥,李霞,李潔,張霞,陳潔生物傳感器與生物電子。2017; 87:970-975.蝦堿性磷酸酶的配體結(jié)合和金屬交換結(jié)晶學(xué)研究。2004; 60(9頁(yè)) : 1555-61。北方對(duì)蝦(Pandalus borealis)的熱可溶性堿性磷酸酶蛋白質(zhì)和 cDNA 序列分析。

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