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Peps6-捕獲BAC試劑盒 說明書
發布時間： 2025-06-11 點擊次數： 313次Apohtech ? 產品與服務
Peps6-捕獲BAC試劑盒
描述：
Peps6-CaptoBAC試劑盒在大多數樣本中進行細菌捕獲。它包括涂有Peps6的磁珠和一種特別開發的緩沖液，以確保最佳的細菌捕獲。 根據試劑盒說明，將樣本稀釋在緩沖液中，然后加入磁珠。經過短暫的振蕩孵育后，去除上清液，同時磁鐵（不提供）將磁珠固定在下方。然后細菌在磁珠上濃縮，并且沒有潛在的抑制劑。它們可以用常規檢測方法進行分析。 該產品的保質期為2年，保存在2-8°C。該產品有25或50測試格式可供選擇。
參考編號：MP10031-50T
數量：50次測試
成分：
1 mL的Peps6磁珠（編號：MP20006-1ML）
50毫升緩沖液TTGB 10X（編號：TP10004-50ML）
Peps6-捕獲BAC試劑盒
描述：
Peps6-CaptoBAC試劑盒在大多數樣本中進行細菌捕獲。它包括涂有Peps6的磁珠和一種特別開發的緩沖液，以確保最佳的細菌捕獲。 根據試劑盒說明，將樣本稀釋在緩沖液中，然后加入磁珠。經過短暫的振蕩孵育后，去除上清液，同時磁鐵（不提供）將磁珠固定在下方。然后細菌在磁珠上濃縮，并且沒有潛在的抑制劑。它們可以用常規檢測方法進行分析。 該產品的保質期為2年，保存溫度為2-8°C。該產品有25或50測試格式可供選擇。
參考編號：MP10031-25T
數量：25次檢測
成分：
0.5 mL的Peps6磁珠（參考編號：MP20006-0.5ML）
25 毫升緩沖液 TTGB 10X（參考編號：TP10004-25ML）
1. 簡介
合成分子 Peps6 源自載脂蛋白 H（ApoH），保留了其結合微生物的能力，包括病毒（1-2）、真菌（3）和細菌（4-6）。ApoH 蛋白也稱為載脂蛋白 H 或 β2 - 糖蛋白 1，其多特異性允許對多種微生物進行多重捕獲。這種親和捕獲方法簡單、溫和且快速，可使微生物保持活力和感染性。捕獲的微生物被濃縮并與潛在抑制劑分離，從而更易通過常規特異性技術（如 PCR、ELISA 等）進行鑒定 / 檢測，顯著提升靈敏度（7-10）。
這些特性使 Peps6-CaptoBAC 試劑盒成為一種創新的樣品預處理工具，用于細菌分離，以便進行高靈敏度的鑒定 / 檢測。2. 123原理
在 Peps6-CaptoBAC 試劑盒中，Peps6 與磁珠結合。試劑盒提供一種特殊結合緩沖液，可增強 Peps6 對細菌的親和力。將 Peps6 磁珠加入任何復雜生物樣本中（用提供的緩沖液稀釋），樣本中的初始雜質和潛在抑制劑可被去除，而通過 Peps6 與磁珠結合的細菌則通過磁鐵保留在試管中。隨后，細菌可通過分子技術（PCR）、免疫檢測（ELISA、WB）或在合適培養基中培養等方法進行鑒定 / 檢測。
3. 45試劑
REF MP20006 – Peps6 磁珠
合成 Peps6 包被的磁珠懸浮液濃度為1013個珠子 / 毫升，珠子直徑約 200 nm，緩沖液含 < 0.02% 疊化鈉。
REF TP1006704 – TTGB 10X 緩沖液
TTGB 10X 緩沖液為淺黃色水性結合緩沖液，經 0.2 µm 過濾，濃縮 10 倍，使用前需按說明稀釋。
注意：試劑盒中89的所有試劑均可單獨購買。4. 10存儲
所有試劑可在室溫下運輸，功能不受影響；收到后需存儲于 2-8°C。
所有試劑在 2-8°11C 下可穩定保存至有效期。
Peps6 磁珠瓶需12直立存放，確保磁珠始終浸沒在存儲液中。
使用后，所有試劑需13迅速放回 2-8°C 存儲。
5. 14所需材料（未提供）
無菌蒸餾水。
合適的微量移液器和無菌濾芯吸頭。
合適的反應管（玻璃或聚丙烯塑料材質，避免聚苯乙烯）。
孵育過程中用于樣品15攪拌的設備。
溫控培養箱。
層流罩或目標微生物所需的特定微生物環境。
與試管兼容的側向磁16吸裝置（注意：不同市售磁鐵的吸引力和速度可能不同）。
目標微生物檢測所需17的材料和試劑。
6. 18安全注意事項
為確保穩定性，所有試劑需小心處理，避免污染。
是否需要無菌操作區19域取決于捕獲微生物的用途（如需培養則必須無菌）。
Peps6 磁珠存儲20緩沖液含 < 0.02% 疊化鈉，痕量疊化鈉不影響捕獲或微生物活力，使用前無需清洗磁珠。疊化鈉可能與銅或鉛管道反應生成爆炸性疊氮化物，通過管道處理時需用大量水沖洗，防止疊氮化物堆積。
試劑和樣本需按照良21好實驗室規范處理，未使用的試劑、樣本和廢棄物需按當地法規處置。
請勿使用過期試劑。22
7. 23重要提示
本方案為最多 5 mL 樣本中細菌結合的通用指南，根據細菌菌株、樣本性質和體積，可能需要進一步優化以實現最佳結合能力。
ApoH 捕獲機制不同于24常規抗原 - 抗體相互作用，如需確保實驗成功，請聯系我們的技術支持。
捕獲細菌前，Peps62526磁珠不得渦旋、冷凍、干燥、高溫（>60°C）或端 pH（>9 或 < 5）處理。若需保留微生物活力，捕獲后也需遵循同樣注意事項。若懷疑微生物負載較27高，可增加磁珠體積。磁珠可結合大量微生物：1 µL 磁珠可從純培養物中結合1×107個大腸桿菌。
8. 28樣本采集與處理
現有數據表明，Peps6 磁珠可捕獲各種固體（懸浮后）或液體樣本中的細菌。
固體樣本（如肉類、29組織）需在 1X 捕獲緩沖液中研磨，過濾后再加入磁珠，否則磁珠可能被樣本顆粒卡住，無法磁化。
優先使用新鮮樣本，30避免混合樣本。混合血液、血清或血漿可能形成凝塊，捕獲并聚集磁珠，使其無法結合微生物。
若進行細菌添加實驗31，需使用臨床菌株而非 “標準菌株"（如 ATCC 菌株），許多標準菌株對 ApoH 蛋白或 Peps6 分子的親和力會下降。
使用全血時，需選擇32EDTA 抗凝劑。
所有稀釋或處理后的33樣本需迅速與 Peps6 磁珠接觸。
樣本體積可按比例調34整，若懷疑微生物滴度較低，可擴大樣本體積。超過 5 mL 的樣本，需聯系技術支持。
受損微生物可能失去對 A35poH 蛋白或 Peps6 分子的親和力，因此：優先使用新鮮樣本材料。
檢查冷凍樣本中細菌36的活力，避免樣本反復凍融。
使用劣質樣本會導致37靈敏度下降。
9. 38使用說明
樣本在捕獲緩沖液中的稀釋
將樣本稀釋于捕獲緩沖液中并渦旋，稀釋后緩沖液終濃度必須為 1X：小體積樣本（1-199 µL）：將 TTGB 10X 緩沖液用無菌蒸餾水稀釋至 1X，加入足夠的 1X TTGB 緩沖液，使樣本總體積達到 1 mL。
大體積樣本（039.2-5.0 mL）：將 TTGB 10X 緩沖液用無菌蒸餾水稀釋至 2X，按 1:1 體積比加入樣本中。
捕獲步驟 40
使用前，通過輕柔吹打或手動倒置底重懸 Peps6 磁珠（切勿渦旋）。
每個樣本加入 20 41µL Peps6 磁珠。
輕輕混勻（切勿渦旋42）。
在 35-37°C 下43適當攪拌孵育 30 分鐘：試管需直立并劇烈攪拌，使磁珠保持懸浮狀態（如設置 Thermomixer 為 1000 rpm）。
將反應管置于磁鐵上44，直至所有磁珠側向沉淀且上清液澄清。
棄去上清液，避免擾45動磁珠沉淀，細菌即濃縮于沉淀中。
洗滌（可選）46
純培養物、血漿或血清無需洗滌，全血等復雜樣本可能需要洗滌：向磁鐵上的磁珠沉淀中輕輕加入 1 mL PBS（不含Ca2+/Mg2+），勿重懸磁珠。
棄去上清液，避免擾47動沉淀。
如需可重復洗滌一次48。
10.49 細菌檢測
結合的細菌可直接在 Peps6 磁珠上通過標準方案檢測（必要時可調整）。注意：小體積樣本需在加入重懸液前短暫離心磁珠沉淀。
培養：將磁50珠重懸于合適培養基中，直接涂布于培養皿，在細菌適宜溫度下孵育。
PCR：將51磁珠重懸于裂解緩沖液中，劇烈渦旋 15 秒以破壞沉淀。裂解后，通過磁鐵或離心（10,000 g，1 分鐘）去除磁珠，轉移上清液至新管，按常規流程提取 DNA 并進行 PCR。
顯微鏡觀察52：將磁珠重懸于 PBS 或特定培養基中，磁珠無自發熒光，可用于熒光檢測。
其他方法：53將磁珠重懸于適當溶液中，如需其他特定應用，請聯系技術支持。
11.54 故障排除
以下為常見問題指南，如需進一步幫助或定制方案，請聯系技術支持。
磁珠和緩沖液處理55需在無菌環境中打開 Peps6 磁珠瓶，污染會降低穩定性和效率。
必須將磁珠加入樣本56中，而非反向操作。
使用無菌蒸餾水稀釋57緩沖液，確保混合后 TTGB 緩沖液為 1X 濃度。
檢查 TTGB 緩沖液58是否污染。
根據微生物或樣本類59型，可優化捕獲緩沖液的選擇和用量。
大體積樣本 60
5-100 mL 大體積樣本需額外購買磁珠和緩沖液。
樣本稀釋：直接加入612X 或 10X 濃縮的 TTGB 緩沖液，使終濃度為 1X。
每個樣本加入 20 62µL 磁珠，超過 10 mL 的樣本可能需要增加磁珠體積。
超過 20 mL 的樣63本可采用軌道攪拌（設置為 3 rpm）代替直立攪拌。
大體積樣本需預溫至64室溫或孵育溫度后再加入磁珠。
孵育
-65 嚴格遵循溫度和時間以確保最佳結果。選擇足夠大的試管以66保證充分攪拌（如 1 mL 反應用 1.5 mL 試管）。
試管需直立并劇烈攪67拌（如 1000 rpm），使用玻璃或聚丙烯試管，避免聚苯乙烯。
磁化
-6869 若上清液中殘留磁珠或沉淀被吸頭擾動，需延長磁化時間（細胞培養樣本通常 2 分鐘，全血樣本可達 15 分鐘）。使用高能釹磁鐵（870-12 kg 吸引力）確保磁珠全磁化，磁力過低會導致磁珠和微生物損失，過強可能使磁珠嵌入塑料管。
吸棄上清液前需去除71氣泡。
磁化時間不得超過 3720 分鐘，以免破壞微生物完整性。
洗滌
-73 細胞上清液、血漿或血清無需洗滌（除非檢測系統高度敏感），全血等復雜樣本可能需要洗滌 2 次，洗滌時需在磁鐵上操作，切勿渦旋。PBS 可替換為其他74洗滌緩沖液，需聯系技術支持確認兼容性。
檢測
-75 部分細菌捕獲后無法培養（處于活但不可培養狀態），需通過顯微鏡或 PCR 驗證捕獲效果。裂解步驟至關重要，76裂解緩沖液效率取決于化學組成，建議添加裂解對照，可劇烈渦旋磁珠以確保裂解充分。
如需光密度測量，需77用磁鐵去除磁珠，僅檢測上清液（磁珠呈深棕色，會嚴重干擾光學測量）。
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